Bleach-concentrated direct sputum smear microscopy procedure for diagnosis of pulmonary tuberculosis in poverty areas / Microscopia direta de amostra de escarro concentrado em água sanitária para diagnóstico de tuberculose pulmonar

ABSTRACT INTRODUCTION: Pulmonary tuberculosis caused by Mycobacterium tuberculosis is a serious public health problem affecting millions of people worldwide. The development of easy and low-cost diagnostic methods is crucial for disease control in rural remote and poverty areas and among vulnerable groups. OBJECTIVE: To evaluate the accuracy of laboratory methods for the diagnosis of Pulmonary tuberculosis. MATERIAL AND METHODS: Sputum samples from patients with clinical signs and symptoms were analyzed by microscopy after chemical treatment and spontaneous sedimentation and compared with methods employed routinely: direct sputum smear microscopy, culture, and GeneXpert®MTB/RIF. RESULTS: From the samples analyzed, 16% were positive by microscopy in the processed samples, 18% by both culture and Xpert®MTB/RIF, while 13% in the direct microscopy. The processed samples showed a 31% increase in positivity (57 samples) compared to conventional direct microscopy. In the analysis of the accuracy of the evaluated methods, all the results were statistically significant proving that they were not randomly positive or negative and confirming that there is a tendency for these results. CONCLUSION: Chemical treatment and spontaneous sedimentation of the sputum samples procedure represent an effective diagnostic tool in situations where more advanced technologies are not feasible. Besides the higher accuracy and greater detection of positive cases regarding the direct smear, the procedure strengthens biosafety by decreasing the risks of aerial contamination by Mycobacterium tuberculosis for laboratory professionals.

RESUMEN INTRODUCCIÓN: La tuberculosis pulmonar causada por Mycobacterium tuberculosis es un grave problema de salud pública que afecta millones de individuos en el mundo. El desarrollo de métodos de diagnóstico fáciles y de bajo costo es esencial para el control de la enfermedad en zonas rurales remotas y pobres y entre los grupos vulnerables. OBJETIVO: Evaluar la exactitud de métodos de laboratorio para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar. MATERIAL Y MÉTODO: Las muestras del esputo de pacientes con signos y síntomas clínicos fueron analizadas por microscopía luego de tratamiento químico y sedimentación espontánea y comparados con métodos empleados ordinariamente: baciloscopía directa de esputo, cultivo y GeneXpert® MTB/RIF. RESULTADOS: Entre las muestras analizadas, 16% fueron positivas por microscopía en las muestras procesadas; 18% por cultivo y Xpert® MTB/RIF; y 13% por microscopía directa. Las muestras procesadas presentaran un aumento de 31% de positividad (57 muestras) con respecto a la microscopía directa convencional. En el análisis de los métodos, todos los resultados fueron estadísticamente significativos, comprobando que no eran aleatoriamente positivos o negativos y confirmando que hay una tendencia para esos resultados. CONCLUSIÓN: El tratamiento químico y la sedimentación espontánea de las muestras de esputo representan una herramienta diagnóstica eficaz en las situaciones en las cuales tecnologías más avanzadas no son viables. Además de la mayor precisión y mayor detección de casos positivos de lo que hace el frotis directo, el procedimiento fortalece la bioseguridad, disminuyendo los riesgos de contaminación del aire por Mycobacterium tuberculosis para el personal de laboratorio.

RESUMO INTRODUÇÃO: A tuberculose pulmonar causada por Mycobacterium tuberculosis é um grave problema de saúde pública que afeta mundialmente milhões de indivíduos. O desenvolvimento de métodos de diagnóstico fáceis e de baixo custo é essencial para o controle da doença nas áreas rurais remotas e de pobreza e entre os grupos vulneráveis. OBJETIVO: Avaliar a acurácia dos métodos laboratoriais para o diagnóstico de tuberculose pulmonar. MATERIAL E MÉTODOS: As amostras de escarro de pacientes com sinais e sintomas clínicos foram analisadas por microscopia após tratamento químico e sedimentação espontânea e comparadas com métodos empregados rotineiramente: baciloscopia direta do escarro, cultura e GeneXpert® MTB/RIF. RESULTADOS: Das amostras analisadas, 16% foram positivas por microscopia nas amostras processadas; 18%, por cultura e Xpert® MTB/RIF; e 13%, por microscopia direta. As amostras processadas apresentaram um aumento de 31% de positividade (57 amostras) em relação à microscopia direta convencional. Na análise dos métodos avaliados, todos os resultados foram estatisticamente significativos, comprovando que não eram positivos ou negativos aleatoriamente e confirmando que há uma tendência para esses resultados. CONCLUSÃO: O tratamento químico e a sedimentação espontânea das amostras de escarro representam uma ferramenta diagnóstica eficaz nas situações em que tecnologias mais avançadas não são viáveis. Além da maior precisão e maior detecção de casos positivos em relação ao esfregaço direto, o procedimento reforça a biossegurança, diminuindo os riscos de contaminação aérea por Mycobacterium tuberculosis para profissionais de laboratório

Análise comparativa da técnica de baciloscopia no diagnósticoda tuberculose pulmonar frente ao GeneXpert em amostras depacientes da cidade de Recife, Pernambuco / Comparative analysis of the bacilloscopy technique in the diagnosis of pulmonary tuberculosis against GeneXpert in samples of patients in the city of Recife, Pernambuco

Objetivo: Considerando que atualmente ainda existem algumas limitações quanto à escolha do teste ideal para diagnóstico da TB, ligadas principalmente aos custos e realização adequada das técnicas, o presente estudo teve por objetivo verificar a eficácia do teste de baciloscopia no diagnóstico da tuberculose pulmonar, a partir da comparação dos resultados obtidos através dos testes de baciloscopia e GeneXpert de pacientes da cidade de Recife-PE. Métodos: Foram analisadas neste estudo amostras de escarro com os resultados já positivos para TB através da cultura microbiológica. As espécimes foram submetidas ainda aos testes de baciloscopia e GeneXpert para uma análise comparativa dos resultados. Resultados: Foi analisado um total de 100 amostras, com positividade para todos os testes realizados no estudo (cultura microbiológica, GeneXpert e baciloscopia). Conclusão: O diagnóstico através do GeneXpert representa um ganho expressivo quando levado em conta sua sensibilidade, rapidez e confiabilidade dos resultados, em contrapartida, os custos para realização deste teste ainda são elevados. Este fato reforça a importância das metodologias convencionais de baciloscopia e cultura, quando utilizadas dentro dos parâmetros de controle de qualidade adequados.

Objective: Considering that currently there are still some limitations regarding the choice of the ideal test for diagnosis of TB, related mainly to costs and adequate performance of the techniques, the present study aimed to verify the efficacy of the bacilloscopy test in the diagnosis of pulmonary tuberculosis, based on the comparison of the results obtained through the bacilloscopy and GeneXpert tests of patients from the city of Recife-PE. Methods: Sputum samples with already positive results for TB were analyzed in this study through the microbiological culture. The specimens were also submitted to bacilloscopy and GeneXpert tests for a comparative analysis of the results. Results: A total of 100 samples were analyzed, with positivity for all tests performed in the study (microbiological culture, GeneXpert and smear microscopy). Conclusion: The diagnosis through GeneXpert represents an expressive gain when taking into account its sensitivity, speed and reliability of results, in contrast, the costs to perform this test are still high. This fact reinforces the importance of conventional bacilloscopy and culture methodologies when used within the appropriate quality control parameters

Incremento da baciloscopia no diagnóstico de tuberculose pulmonar em pessoas privadas de liberdade / Increment of the microscopy in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in inmates

Objetivo: Avaliar um procedimento de fácil execução e baixo custo para incrementar o diagnóstico da tuberculose entre pessoas privadas de liberdade sem riscos de contaminação para profissionais de laboratório. Métodos: Amostras de escarro foram analisadas por baciloscopia após tratamento com hipoclorito de sódio e sedimentação espontânea em comparação à baciloscopia direta convencional, cultura pelo método Ogawa-Kudoh e o teste molecular rápido pelo sistema Xpert®MTB/RIF. Para as análises estatísticas foram empregados os programas Open Epi e SPSS. Resultados: De 436 amostras de escarro submetidas ao cultivo 71 foram positivas (verdadeiros positivos) e dessas 50 foram positivas pela baciloscopia direta convencional e 67 pela baciloscopia do escarro processado, o que corresponde a um incremento de 29% na positividade. Conclusão: O procedimento proposto preserva as vantagens e aumenta a sensibilidade da baciloscopia direta convencional. A implementação dessa técnica para diagnóstico entre grupos vulneráveis em locais de acesso e recursos limitados poderá aumentar a identificação de casos de tuberculose pulmonar.

Microscopic detection of Mycobacterium tuberculosis in direct or processed sputum smears.

INTRODUCTION: Microscopic identification of active pulmonary tuberculosis (PTB) from direct smears of sputum (DS) is widely used for detection, but has limited sensitivity. Here, we assessed the yield of acid-fast bacilli (AFB) detection in processed sputum smears (PSS). METHODS: Sputum samples were simultaneously analyzed by direct sputum smearing and after chemical treatment and spontaneous sedimentation. RESULTS: Of the 1,719 samples analyzed, 16.4% were positive for AFB in conventional DS and 21.4% in PSS, corresponding to a 30% increase in detection. CONCLUSIONS: Increased sensitivity from analyzing PSS and better safety protocols will contribute to improved detection and control of the disease.

Microscopic detection of Mycobacterium tuberculosis in direct or processed sputum smears

Abstract INTRODUCTION: Microscopic identification of active pulmonary tuberculosis (PTB) from direct smears of sputum (DS) is widely used for detection, but has limited sensitivity. Here, we assessed the yield of acid-fast bacilli (AFB) detection in processed sputum smears (PSS). METHODS: Sputum samples were simultaneously analyzed by direct sputum smearing and after chemical treatment and spontaneous sedimentation. RESULTS: Of the 1,719 samples analyzed, 16.4% were positive for AFB in conventional DS and 21.4% in PSS, corresponding to a 30% increase in detection. CONCLUSIONS: Increased sensitivity from analyzing PSS and better safety protocols will contribute to improved detection and control of the disease.

Antimicrobial activity of surfactants produced by Bacillus subtilis R14 against multidrug-resistant bacteria

Lipopeptides represent a class of microbial surfactants with increasing scientific, therapeutic and biotechnological interests. The genus Bacillus is a producer of these active compounds, and among them B. subtilis produces surfactin, the most potent biosurfactant known. These compounds can act as antibiotics, antivirals, antitumorals, immunomodulators and enzyme inhibitors. In this work, the antimicrobial activity of biosurfactants obtained by cultivation of B. subtilis R14 was investigated against multidrug-resistant bacteria. During cultivation in defined medium, the surface tension of the medium was reduced from 54 mN/m in the beginning of the microbial growth to 30 mN/m after 20 hours. A crude surfactant concentration of 2.0 g/L was obtained after 40 hours of cultivation. A preliminary characterization suggested that two surfactants were produced. The evaluation of the antimicrobial activity of these compounds was carried out against 29 bacteria. Enterococcus faecalis (11 strains), Staphylococcus aureus (6 strains) and Pseudomonas aeruginosa (7 strains) and Escherichia coli CI 18 (1 strain) displayed a profile of well defined drug resistance. All strains were sensitive to the surfactants, in particular Enterococcus faecalis. The results demonstrated that lipopeptides have a broad spectrum of action, including antimicrobial activity against microorganisms with multidrug-resistant profiles.

Os lipopeptídeos representam uma classe de surfactantes microbiológicos com crescente interesse científico, terapêutico e biotecnológico. O gênero Bacillus é um dos maiores produtores destes compostos ativos. Dentre as espécies produtoras de biossurfactante, B. subtilis produz surfactina um dos mais conhecidos. Estes compostos atuam como antibióticos, antivirais, agente antitumorais, imunomoduladores e inibidores enzimáticos. O objetivo deste trabalho foi determinar a atividade antimicrobiana de biossurfactantes, obtidos pelo cultivo de B. subtilis R14, frente a bactérias multidroga-resistentes. Durante o cultivo em meio quimicamente definido, a tensão superficial do meio foi reduzida de 54 mN/m no início do crescimento microbiano para 30 mN/m depois de 20 h. Uma concentração de surfactante bruto de 2 g/L foi obtida depois de 40h de cultivo. Uma caracterização preliminar sugeriu que dois surfactantes foram produzidos. A avaliação antimicrobiana destes compostos foi realizada frente a vinte e nove bactérias. O perfil de multidroga-resistência foi previamente definido para Enterococcus faecalis (11 cepas) Staphylococcus aureus (6 cepas), Pseudomonas aeruginosa (7 cepas) e Escherichia coli IC18. Todas as cepas foram sensíveis aos surfactantes, em particular Enterococcus faecalis. Os resultados demonstraram que os lipopeptídios têm um amplo espectro de ação, incluindo microrganismos multidroga-resistentes.